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Endoderm lineage labelling using BAC reporter constructs in ES cells and mouse embryos.

Markierung entodermaler Zellen mittels BAC Reporten in ES-Zellen und Mausembryonen.

München, Technische Universität, Fakultät Wissenschaftszentrum Weihenstephan, Diss., 2009, 166 S.
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The endoderm is one of the three embryonic germ layers that gives rise to inner organs like lung, liver and pancreas. BAC recombineering was used to generate transgenic embryonic stem cells and mouse lines containing fluorescent reporters under the control of important endodermal genes like Foxa2, Sox17, Hhex, Nkx2.1 and Pdx1. This allowed the analysis of the specific expression patterns of those genes during endoderm and organ formation. In particular, the analysis of the Hhex reporter expression showed new insights during endoderm development and organogenesis. Moreover, the use of whole mount antibody stainings showed the contemporaneous downregulation of BMP-signalling during these events. Therefore, this analysis offered useful new tools for the study of early endodermal developmental events.
Um die Differenzierung der entoderm-abgeleiteten Organe Lunge, Leber und Pancreas und der entodermalen Vorläuferzellen zu analysieren, wurden transgene fluoreszierende Reportergene verwendet, die unter der Kontrolle von Foxa2, Sox17, Hhex, Nkx2.1 und Pdx1stehen. Mittels homologer Rekombination in Bakterien wurden BAC Reporter-Konstrukte generiert und transgene Mäuse hergestellt. Die Analyse der Reporteraktivität in ES Zellen und Mausembryonen hat gezeigt, dass die Reporterproteine für die Analyse der Entodermentwicklung in der Differenzierung von embryonalen Stamm (ES)-Zellen und der Entwicklung der Maus geeignet sind. Zusätzlich wurden über die Untersuchung von aktiven Signaltransduktionswegen Elemente der BMP-Signalkaskade als mögliche Faktoren der Entodermdifferenzierung identifiziert.
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Publikationstyp Sonstiges: Hochschulschrift
Typ der Hochschulschrift Dissertationsschrift
Schlagwörter Endoderm; BAC; Recombineering; Hhex; Nkx2.1; Foxa2; Sox17; Pdx1
Quellenangaben Band: , Heft: , Seiten: 166 S. Artikelnummer: , Supplement: ,
Hochschule Technische Universität
Hochschulort München
Fakultät Fakultät Wissenschaftszentrum Weihenstephan